Prominence nano 纳升液相色谱仪

Prominence nano 纳升液相色谱仪
Prominence nano系列是一套纳升LC系统，可在纳升流量下进行精准流速的溶剂输送。按照应用不同，可以配置成1D和2D系统。
Prominence nano具备纳升流速下的高保留时间重复性，非常低的系统死体积和极低的交叉污染等特点。

Nano-Assist一维LC设置图

应用

高保留时间重复性

蛋白质组分析需要比较不同样本的色谱峰差异，而样本中又存在许多特征相似的多肽，对保留时间的重复性要求非常高。Prominence nano系统的高重复性可保证蛋白质组分析的高精数据，配置了RFC系统的LC-20AD nano可以在流速为300 nL/min获得RSD不超过0.2% 的保留时间重复性。

牛血清白蛋白（BSA）酶解样品的重复性

2维 LC的高分辨率

牛血清白蛋白（BSA）酶解样品的重复性

在蛋白质组学分析时，单一的1D反相分离不足以提供足够的色谱峰容量；所以，为了实现复杂样品的分离，需要进行2D分离以保证足够的峰容量。Prominence nano系统可以进行2D分析，结合阳离子交换和反相模式，为蛋白质组学分析提供所需的核心技术。下图为200fmol酵母蛋白质的分析图，1D分离中的未分离组分在2D中继续分离成几个组分，2D分离的峰容量大大大于1D所获得的效果。

分析条件

1维

柱	PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.)
流动相	甲酸铵缓冲液 浓度STEP梯度
流速	40 nL/min
捕集柱	(5 mmL.×300 m I.D.) L-column （micro）
捕集时长	5分钟
脱盐溶剂	水/蚁酸=100/0.1
脱盐流速	L/min
脱盐时长	5分钟

2维

柱	PicoFrit (100 mmL.×75 m I.D.)
流动相	梯度洗脱 A)水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v)
流速	600nL/min
温度	温度
检测	LCMS-IT-TOF
样本	酵母蛋白中的蛋白 （相当于200 fmol的）

分别利用1维和2维中不同类型的柱体进行其他组合的分离模式也是可行的。在这种情况下，分离或检测方法由于使用的移动相分离模式或类型之间的相互作用，可能会有一些限制。

连接MALDI-TOFMS使用

Prominence nano系统不仅仅可以通过nano ESI接口连接LCMS使用，还可连接到配有自动点靶仪的MALDI-TOFMS仪器。为了准确分析MALDI靶的每个色谱峰，需要LC能够在1nL到1µL范围之内精确控制流速，Prominence nano系统的完全满足了此需要。

酶解BSA样品的UV色谱图（500fmol）

分析条件

检测器	UV220 nm
柱	MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap (250 mmL. × 100 µm I.D.)
流动相	1、水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v) 2、梯度洗脱
流速	1 µL/min
温度	环境温度
捕捉柱	ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.)
点靶间隔	12 秒的点断 每点液体：200nL（不包括基质）

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